组织化学技术总论

一、定义：把组织学和生物化学结合在一起的一门学科。
定义：在细胞和组织中，以化学或物理试验法，对某些特殊物质、反应基团和酶促活性进行识别，定位和定量。
二、组织化学的特点：
能够测定化学物质在组织中或细胞内的部位如：RNA—胞浆内、DNA—核内。
三、组织化学的要求：
1、组织要新鲜，有的需要特殊的固定。有的则不要求固定。
2、作用要快，定位定性要准确。所沉淀的颗粒要细。如果作用时间长，则酶容易发生扩散。
3、产生的反应物必须有一定的颜色，这颜色越新鲜越好，如碱性磷酸酶—棕黑色。
4、最后所显示的颜色要有稳定性。
5、所用的试剂纯度要高，尽可能使用保证试剂或分析纯。
6、试剂的分类：
（1）GR（guarantee reagent）保证试剂
（2）AR（analytical reagent）分析试剂
（3）CR（chemical pure）化学纯
（4）LR（laboratory reagent）实验试剂
7、使用器皿要清洁，以免发生人为的沉淀而混淆了阳性。
8、各种试剂的量要准确，不能随意加大任何一种试剂的量。
四、组织化学的方法
1、组织化学的呈色反应
利用细胞内某些物质的物理化学特性，与一种试剂或染料发生反应，产生有色的沉淀，在细胞的所在部位显示出来。
2、免疫组化、免疫荧光法
利用抗原抗体的反应的原理来对各种组织进行定性，对细胞内的物质进行定位。
3、放射自显影术：
利用合适的放射性同位素的粒子，对某些化学物质进行定位测定。
五、一般组织化学的内容
1、色素和无机盐（钙、铁、黑色素、脂褐素，胆色素）
2、脂类（中性脂肪，酸性脂肪，碱性磷酸酯，胆固醇）
3、核酸（DNA、RNA）
4、糖类（单糖、双糖、多糖、粘多糖、粘蛋白、糖脂）
5、蛋白质（显示各种氨基酸或某些功能基）
6、酶（水解酶，碱、酸性磷酸酶、氧化还原酶、各种脱氧脱氢酶）

2007年5月10日星期四 9:51 PM